客服热线
15805933710
地址：厦门市集美大道1300号
电话：15805933710
联系人：许先生
QQ：1974707632 (节假日也可咨询)
微信：15805933710 (节假日也可咨询)
邮件：purimag@139.com
【产品介绍】
磁珠法PCR产物纯化试剂盒是普睿迈格生物科技有限公司最新研制的一种PCR产物纯化试剂盒。本试剂盒是利用磁性纳米分离技术从PCR反应产物及其他酶促反应物中，简单、快速、高效提取纯化高质量DNA，并能有效的除去蛋白质，dNTP，引物等杂质，适用于自动化核酸纯化平台，纯化后的DNA A260/A280的比值在1.7-1.9之间，A260/A230的比值通常在2.0以上，可以应用到各类下游分子生物学实验。
【特点】
l 适用范围广，回收效率高，对于100 bp~50 kb之间的DNA片段回收效率在95%以上。
l 样品体积范围广，不需要离心。
l 操作简单快速，20~30min完成核酸纯化。
l 实现核酸纯化高通量化和自动化。
【保存方法及注意事项】
请将试剂盒中的PuriMag Beads置于2-8℃保存，其余试剂室温保存，有效期详见包装。
l 严禁冰冻、离心。冰冻、离心可能会对磁珠造成不可逆的损害。
l 磁珠长期放置后会聚集成团，从而使磁珠表面积减小，降低样品回收得率，使用前一定要涡旋振荡彻底混匀磁珠（通常需涡旋振荡20秒）。
l 本试剂盒不适用于纯化回收小于100 bp的DNA片段，如果要回收小于100bp的DNA片段，可将PuriMag PCRbead的用量增加到样品体积的4倍。
【纯化回收得率的计算】
建议通过琼脂糖电泳纯化前后的样品进行回收得率的计算，不建议通过260nm处的光吸收值来计算回收得率。溶液中单链、双链DNA和dNTP以及一些纯化前的某些杂质在260nm处都有光吸收，这样在计算回收前样品中DNA浓度时会得到一个虚高的DNA浓度值。
【试剂盒组成】
组分
100次
保存
PuriMag PCRbead
4 ml
2-8℃
Wash buffer
75%乙醇（用户自备）
常温
Elution buffer
5 ml
异丙醇
用户自备
DNA浓度及纯度检测 ：（1）得到的基因组DNA片段大小与样品保存时间、操作过程中剪切力等因素有关，所得DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度和纯度。 （2）DNA应在OD260处有显著吸收峰，OD260=1相当于大约50ng/ul双链DNA，40ng/ul单链DNA。OD260/OD280比值应为1.7~1.9，如果洗脱时使用去离子水，比值会偏低，因为pH和离子会影响吸光度，并不表示纯度低。
【操作步骤】
结合→
1) 向1.5 ml的离心管或PCR管中加入待纯化的PCR产物， 然后加入2倍样品体积的PuriMag PCRbead，颠倒混匀数次，磁分离后吸弃上清液。
洗涤→
2) 向离心管中加入150 μl Wash buffer，移液枪缓慢吹打混匀，静置1 min，于磁力架上静置20 s，小心吸弃上清液。重复该步骤一次。上清液尽量移除干净，室温晾干5 min，让残留乙醇挥发干净，以免影响后续实验。
洗脱→
3) 向离心管中加入10~50 ul的Elution buffer（Elution buffer在65-70 ℃中预热后洗脱效果更好，减小洗脱体积或多次洗脱可增大DNA浓度），移液枪缓慢吹打混匀1~2 min，将离心管放到磁力架上静置20 s，小心将上清液吸入新离心管中，即为纯化的PCR产物，可存放于2~8 ℃，长期存放需放置于-20 ℃。
