碘乙酰磁珠|Iodoacetyl magnetic microparticles-生物磁珠专家

暂无更多图片。

碘乙酰磁珠|Iodoacetyl magnetic microparticles

更新：2024-3-10 9:38:20点击：

产品品牌PuriMag
产品型号G-IA

产品介绍

1. 概述

PuriMag^TM G-IA碘乙酰基活化磁性纳米微粒是均一的、聚合物包覆的超顺磁纳米粒，亲水表面确保磁珠在各种缓冲液中具有出色的分散性、低非特异吸附和易操作性，表面涂有高密度的碘乙酰基官能团。磁珠粒用于共价偶联含巯基（-SH）的配体。

PuriMag^TM G-IA碘乙酰基活化磁性纳米微粒最适合结合较大的蛋白和小肽，因为亲水性接头可以减少空间位阻。随后，可以高度严格地洗涤含有共价连接的蛋白质的磁珠，实际上消除了任何非特异性结合的蛋白质。独特的表面意味着在基于蛋白质的系统中低的非特异性结合，并且无需使用表面活性剂即可实现出色的处理效果。这些高结合力的磁珠适合在各种研究和诊断应用中使用，无论您是在实验室规模还是对高通量应用有更严格的要求。

特点和优点：

1）与半胱氨酸残基共价和特异结合；

2）水不溶性配体可以在终浓度为10-30％的乙腈或二甲基甲酰胺（DMF）或二甲基亚砜（DMSO）的偶联缓冲液中或在终浓度为6 M盐酸胍的偶联缓冲液中偶联；

3）稳定的共价键和低水平的配体泄漏；

4）产生可重复使用的免疫亲和基质；

5）低非特异性结合；

6）固定1~20 mg蛋白质或0.1~2mg肽/ g磁珠

7.）应用：抗体，蛋白质/肽，DNA / RNA的纯化；细胞分选，免疫沉淀

PuriMag^TM碘乙酰磁珠偶联巯基原理：

2. 产品信息

Product Specifications
Description	Polymer coated Fe₃O₄nanoparticles
Particle Size	200 nm
Number of Beads	~1.7×10¹⁰ beads/mg
Matrix	Proprietary polymer
Functional group	Iodoacetyl groups
Group density	~300 µmole / g of Beads
Magnetization	60~70 EMU/g
Formulation	10mg/mL in in 1M NaCl and 0.02% NaN₃
Stability	pH 3.5~10, 4~50 ℃, most organic solvents
Storage	1 year at 2~8 ℃. Do not freeze.

3. 使用方法

注意：以下方案是将蛋白或多肽与PuriMag^TM G-IA碘乙酰基封端的磁珠偶联的示例。强烈建议进行滴定，以优化用于每种单独应用的磁珠量。该协议可相应地按比例放大和缩小。

A. 所需材料

1）磁力架（用于手动操作）：用于容纳12个单独的1.5~2ml离心管（Mrack02）；用于容纳2个50 ml离心管或2个15 ml离心管（目录号Mrack03）

2）偶联缓冲液

可溶性配体偶联缓冲液：50 mM Tris, 5 mM EDTA-Na, pH 8.5；

不溶性配体偶联缓冲液：50 mM Tris, 5 mM EDTA-Na, pH 8.5, 20- 30% DMSO or DMF or 6M guanidine•HCl

3）洗涤液： 1 M sodium chloride (NaCl) in distilled H2O

4）封闭化合物L-Cysteine•HCl

5）TCEP (tris(2-carboxyethyl)phosphine)

6）Phosphate buffered saline (PBS)

B. 样品准备

注意：

确保要结合的蛋白质/肽具有游离的（还原的）巯基。为了确保可用的巯基游离基，必须使用DTT (dithiothreitol), TCEP (tris(2-carboxyethyl)phosphine), or 2-MEA (2-Mercaptoethylamine•HCl) 等还原剂还原二硫键，然后进行脱盐或透析去除还原剂。

如果重新合成后立即使用新合成的肽，则可直接用于偶联。

对于蛋白质，在室温下用5-10 mM TCEP溶液处理蛋白质30分钟，然后进行透析或脱盐柱。对于IgG抗体，建议使用2-MEA，因为其选择性减少了铰链区二硫键。

如果样品中含有带有游离巯基的还原剂（例如2-巯基乙醇、DTT或TCEP），则必须通过透析或脱盐将其彻底去除。

1）如果可溶，将1-10mg蛋白质/肽溶解在1ml可溶性偶联缓冲液中。如果不溶，则溶于1ml不溶性偶联缓冲液中。

2）如果样品已经悬浮在其他缓冲液中，请用等体积的耦合缓冲液稀释样品。

C. PuriMag^TM磁珠的准备

1）称重并将3 mg磁珠转移到离心管中。通过添加100 μl偶联缓冲液重悬磁珠，并通过剧烈涡旋1~2分钟混合磁珠。

注意：重新水合后，由于官能团的稳定性，应尽快使用磁珠；将一些磁珠悬浮在缓冲液中后，可能会聚集，可以通过剧烈涡旋或非常温和的超声处理10~30秒将其完全悬浮。

2）磁分离，除去上清液。从磁力架移出离心管，并用1 ml偶联缓冲液涡旋悬浮磁珠30秒钟。

3）重复步骤2一次。

D. 偶联

1）将B1或B2中的样品添加到洗涤过的PuriMag^TM磁珠中，并在室温下轻轻旋转孵育30-60分钟。