一、概述
Magarose®️是厦门美博泰生物独家注册的琼脂糖磁性微球商标，内含顺磁性纳米颗粒的琼脂糖（6％）交联而成，粒径10~30 μm，保证了高比表面积、易悬浮、快速磁分离等特性，显著加速操作和实验的重现性。
羧基活化琼脂糖磁珠（Magarose-COOH）含有羧基官能团。配体的胺基通过碳二亚胺（EDC）偶联方法与羧基活化琼脂糖磁珠。在该偶联方法中，树脂的游离羧基与配体的胺基反应，在水溶性碳二亚胺如EDC（N-ethyl-N’-(3-dimethylaminopropyl）存在下，在低pH（4-5）形成稳定的肽键。由于Magarose-COOH磁珠在有机溶剂中稳定，如果需要，可在有机溶剂中进行偶联。
图1. 羧基活化琼脂糖磁珠用于固定含胺分子
二、产品特性
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产品名称
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Magarose-COOH
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货号
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PMAG016
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磁珠浓度
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25% (v/v) in 20% EtOH & 0.9%
NaCl
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配基密度
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~ 60 μmol COOH/ ml磁珠
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介质
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6%交联磁性琼脂糖
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粒径
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10 ~ 30 μm
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配体结合
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>20 mg IgG/ml磁珠
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保存
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常温运输，2~8℃保存一年
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注：磁珠蛋白结合量与目标蛋白特性相关，此处仅作参考值。
三、使用方法
1. 所需材料
w EDC：碳二亚胺
注意: 碳二亚胺用量是微球羧基含量的10-100倍。偶联过程可从0.1M浓度起始，逐渐增加浓度优化。
w Coupling Solution: pH4.5-6的去离子水。或50
%的甘油溶液或二氧六环，调pH 4.5-6。
注意: 使用有机溶剂时，不要使用电极测量pH，会损坏电极。不要使用含胺、磷酸盐或羧基的缓冲液，会与磁珠表面基团竞争反应位点。蛋白、多肽和其它含伯胺小分子的浓度应高于表面羧基含量。
w Coupling conditions: 4 ~ 25℃, pH4.5 ~ 6 反应1.5-24
h。也可在有机溶剂中偶联。
2. 偶联方法
2.1用于偶联的配体的制备
将蛋白质或配体溶解在Coupling
Solution中偶联，pH：4.5-6。如果蛋白质所在缓冲液干扰偶联，则需脱盐或透析进行缓冲液交换至偶联液。
2.2 用于偶联的磁珠的制备
用蒸馏水（pH4.5-6）洗磁珠五次，然后用0.5M的
NaCl（80ml溶液/ ml沉淀磁珠）洗涤磁珠。
2.3 配体与Magarose-COOH磁珠的偶联
1)
以1：0.5至1：1的比例将配体溶液加入琼脂糖磁珠中并轻轻混合以制备悬浮液。
2)
将EDC溶液加入悬浮液中至终浓度为0.1M。
3)
根据配体的类型，将悬浮液在4℃-RT下翻转混合1.5-24小时。
注意：通常在低温下耦合，则偶联反应时间需增加。
4)
在反应的第一个小时期间用0.1M NaOH调节反应混合物的pH。
注意：反应的第一个小时内pH值会降低。
5)
用含有0.5M NaCl的0.1M乙酸盐缓冲液（pH4）洗涤磁珠，然后用含有0.5M
NaCl的0.1M Tris-HCl缓冲液pH8洗涤。
6) 重复步骤5两次。
7) 如果在偶联中没有使用有机溶剂，用5-10磁珠体积的蒸馏水洗涤磁珠。将树脂储存在2-8 ℃的20%乙醇中，加入0.02％叠氮化钠。
注意：当使用有机溶剂进行偶联时，用有机溶剂清洗磁珠，除去过量的配体，然后用蒸馏水清洗。
本产品仅供科研用途！
