抗原/抗体法快速检测新型冠状病毒胶体金试纸原理
胶体金试纸,实际上就是用一种胶体形式的金标记生物大分子,并在PVC材质的试纸固定,留上加样孔,设上检测线和质量控制线,这样样品在加样孔加上之后,再滴加几滴液体介质,让液流向试纸另一端的吸水垫进行流动,试纸上进行层析,一般10~15分钟,等试纸上的免疫反应发生之后,就可以看到胶体金聚集的位置上有没有红色条带出现,肉眼可见的,这样就知道检测结果了。
目前新型冠状病毒上已经宣传报道的有两种胶体金试纸,一种是是检测新型冠状病毒的抗原。
这种方法利用的是双抗体夹心法,也就是针对同一种抗原,试纸上有两种抗体存在,不过在试纸不同的位置上。而胶体金标记的抗体是其中一种 针对抗原的抗体,在试纸的结合垫上。
比如咽拭子、鼻拭子、肺泡灌洗液的样本滴上加样孔之后,再滴加几滴流动介质,临床样本里假如有特异性的病毒抗原,这时候就会被结合垫上的金标抗体所识别,形成抗原抗体复合物。这时候继续往吸水垫方向流动,在检测线上,有另一种针对抗原的抗体,这个抗体识别的抗原表位和金标抗体是不一样的,所以同一个抗原能够同时被这两种抗体所识别。这时候金标抗体就会在检测线处被截留一部分,这样就在检测线上显色了。
当然,金标抗体的量肯定是富余的,所以不会只在检测线处被截留,还会继续往吸水垫方向流动,这时候就有一条质控线。线上面有的是专门针对金标抗体的抗体(也就是抗-抗体,本质是一种抗体,但是它识别的抗原对象也是一种抗体)。因为质控线识别金标抗体的能力是非常强的,所以这条线就一定会显色,这也是质控的道理,如果这条线没有显色,那么这次检测结果是无效的。
所以,阴阳性的判断就很简单了,两条线都显色——阳性;只有质控线显色——阴性;这两种情况之外的都是无效实验。
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