一、稀土元素发光特点

1、Stokes位移大
    Stokes位移达200nm,很容易分辨激发光和发射光，从而排除激发光干扰。而普通荧光物质荧光光谱的Stokes位移只有几十纳米，激发光谱和发射光谱通常有部分重叠，互相干扰严重；



2、衰变时间长
    镧系元素与普通的荧光团比较，镧系元素离子螯合物荧光的衰变时间（decay time）长（10～2000us），为传统荧光的103～106倍。通过时间分辨，可极大地降低了本底荧光,实现了高信噪比；



3、激发光谱宽而发射光谱窄
    镧系螯合物激发光光谱较宽，最大激发波长在300～500nm，可通过增加激发光能量来提高灵敏度。而发射光谱带很窄，甚至不到10nm，可采用只允许发射荧光通过的滤光片，进一步降低本底荧光，狭窄的发射波段为多次分析成为可能。

二、荧光纳米微球

    与经典的时间分辨荧光免疫分析方法DELFIA法不同，时间分辨荧光免疫层析技术采用荧光纳米微球作为标记物，每个微球中可包裹成千上万个荧光分子，大大提高了标记效率，有效的提高了灵敏度；同时纳米荧光微球表面修饰有合适密度的羧基，用于与蛋白或抗体的共价偶联，提高标记物的稳定性。



三、时间分辨荧光免疫层析（TRFILF）原理
    当将含有待测抗原（抗体）的样品滴在加样区，待测样品中的抗原（抗体）与结合垫中的荧光纳米微球标记的抗体（抗原）结合并通过毛细作用向前层析，当达到检测区后，与检测线上固定的抗体（抗原）结合，形成微粒-抗体-抗原-抗体夹心复合物并被固定在检测线上，而多余的荧光微球标记物继续向前层析，与固定在质控线二抗结合。反应结束后，用紫外光源（340nm）对检测区扫描检测，检测线和质控线上荧光纳米微球发出高强度的荧光（615nm），且衰变时间也较长。利用延缓测量时间，待样品基质中自然发生的短寿命荧光（1-10ns）全部衰变后，再测量稀土元素的特异性荧光，这样就可以完全排除特异本底荧光的干扰。通过检测线和质控线荧光强度的强弱及其比值，即可分析出样品中待测物的浓度。


四、时间分辨荧光免疫层析优势
1）灵敏度高，比金标、普通荧光灵敏度高2-3个数量级；
2）可定量检测，根据内置的标准曲线，可给出待测物的具体浓度；
3）标记物稳定，抗干扰强，检测结果重复性好；
4）操作简便，检测时间短，可用于现场筛查；
5）成本便宜，性价比高；

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