ELISA包被抗体实验中常用试剂的配制-生物磁珠专家

2019-6-11 21:46:23点击：

1、抗体或免疫球蛋白稀释液0.01mol/L pH7.2 PBS

2、ELISA洗液及HRP标记抗体稀释液pH7.4，PBST

3、包被液（简称CB）pH9.6

4、ELISA底物液（可溶性底物）

5、DAB底物液（不溶性底物，组化病理等）

6、DAB溶液配制：（组化及Western blot 显色）

称DAB 30mg，用0.05mol/L pH7.6 Trs-HCl缓冲液100ml溶解，如有沉淀，过滤后使用，一般新鲜配制使用；

使用前加入1% H₂O₂ 1ml至1.5ml，H₂O₂浓度为0.01%，混均后使用。

7、3′，3′，5′，5′，-四甲基联苯胺（TMB）溶液配制

用二甲基甲酰胺（dimethylformamide，DMF）或无水乙醇，将TMB配成1%浓度，4°C保存半年以内使用；

使用前，用pH5.0磷酸-柠檬酸底物液9.9ml加入0.1ml（1mg/TMB）1% TMB溶液中，再按每毫升TMB加入30% H₂O₂ 1ul，混匀后立即使用。2N H₂SO₄终止后，450nm测定OD值。

8、1%离子琼脂胶配制液

作免疫双相扩散，单相扩散及免疫电泳中使用。

0.05U pH8.6 巴比妥钠-HCL缓冲液。