抗原/抗体法快速检测新型冠状病毒胶体金试纸原理
上面介绍的是检测抗原的 双抗体夹心法,另外一种是检测患者血液里特异性针对新型冠状病毒的IgM抗体。这种就是IgM捕捉法的胶体金试纸。
首先要了解人体抗体应答的规律——
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人体在接触外来抗原的时候,最早产生的抗体是IgM(Ig就是Immunoglobulin/免疫球蛋白的意思),但是也需要是机体感受病原刺激大约一周以后才出现,所以在检测时间窗口上来说,不如核酸检测来的快。
IgM实际上就是B淋巴细胞表面的B细胞受体(BCR)的分泌形式,这是在人体发育成熟的过程中预先备好的巡逻兵,但是相当于是新兵蛋子,还没真正见过敌人。IgM在识别抗原以后,产生这些IgM的B细胞会进入淋巴结,在这里被已经分析好敌情的抗原提呈细胞APC(主要是树突状细胞DC)和辅助性T淋巴细胞的帮助训练下,杀敌本领有的质的飞跃,B细胞自己也有了觉悟,出现了进化,相当于Civ里一级战士变成了6级战士,进化的结果就是从B细胞分化为浆细胞,浆细胞可以大量分泌抗体,而且这些抗体的亲和力比IgM会高很多,这就是IgG。IgG会在机体内存在很长时间,有的甚至可以存在几十年。但是IgM只在病原体刚来的时候会出现,持续时间大约一周,所以,可以用IgM来反应机体是不是处于急性感染状态。
在了解机体抗体应答规律之后,我们就知道了,如果能检测到人体血液里存在针对新型冠状病毒的IgM抗体,那么就可以下临床诊断了。
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那IgM捕捉法的胶体金试纸的原理也就很好理解了。
试纸的布局还是一样的,只不过每一处的东西不一样了——
样品垫上滴加的是血液样本(血清),这里面可能有针对新型冠状病毒的IgM抗体,在结合垫处预留的金标的抗原,而不是金标的抗体。这个抗原就是新型冠状病毒的一个蛋白(体外重组表达出来的)。这样IgM就会结合这个抗原,并且把胶体金带上了。检测线的位置放的是针对人IgM的抗体,这样,如果血液样本里有IgM,就会被这个地方的抗体截留一部分,但是如果这些IgM不能识别结合垫处的金标冠状病毒抗原,那么检测线也不会显色。所以这是检测线的原理。
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对于质控线来说,这里留的是针对结合垫处的金标抗原的实验室制备的抗体,所以,不管样本里有没有特异性的IgM,只要加了流动介质,结合垫处的金标抗原都会被这个地方所捕获,也就是质控线一定会显色。 那这个质控就和上面一样简单了,大约15分钟,就能根据两条线的显色情况下判断了。
原理介绍完了,胶体金的最大优点就是快速,方便。
但是缺点也很明显——通量不高,另外试纸的准确性高度依赖于抗体的特异性,如果抗体质量不好,那很容易有交叉反应,造成误判。另外,IgM产生的时间要晚于病毒复制的时间,所以检测窗口也不如核酸检测。
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