1.什么是链霉亲和素（Streptavidin，SA）？

答：链霉亲和素(streptavidin)是由阿维丁链霉菌（Streptomyces avidinii）分泌的一种小分子非糖基化蛋白质，与亲和素(avidin)有相似生物学特性。其天然形式为同源四聚体，分子量约60kDa。 SA及其衍生物与生物素的亲和力更强，特异性结合更高。已被广泛用于生物技术领域。

2.Streptavidin有何用途？

答：Streptavidin已被广泛应用于酶联免疫吸附实验(ELISA)、组织工程、免疫组织化学、时间分辨免疫荧光技术（TRFIA）、DNA探针、QPCR、亲和色谱填料和SA磁珠、单克隆抗体纯化、生物传感器、等离子检测、生物纳米材料、靶向制药、生物芯片等生物技术领域。

3.为什么要用SA技术更新老旧的二抗ELISA？

答：一、与传统ELISA相比，链霉亲和素的ELISA的灵敏度提高了5-20倍，且特异性高。

二、与传统ELISA相比，使用SA技术能够大大减少抗体用量(节省60％以上)，节省试验成本。

4.SA是怎样提高诊断检测灵敏度的？

答： 天然链霉亲和素分子可以高度特异性地与四分子生物素结合，两者之间的亲和力极为强烈。在用于标记检测时，先将抗体进行生物素化，标记后的SA与生物素化一抗或者二抗结合，将反应信号进行了两步或者三步放大，大大提高检测的灵敏度。

5.SA的活性单位代表什么？

答：1mg链霉亲和素蛋白结合生物素的微克数就是链霉亲和素的活性单位，它代表了SA结合生物素的能力。

6.SA的亲和力含义是什么？

答：SA的亲和力就是SA与生物素或者生物素衍生物特异性结合的能力。

7.SA的活性单位高能代表亲和力就好吗？

答：不能。天然核心SA国际比活为12-15 U，SA118比SA核心结构少9个氨基酸，因为其分子小，比活高达16-18 U,但其偶联效率、亲和力、半衰期均不及SA159、SA127等核心结构。

8.结合稳定性SA的优势是什么？

答：结合稳定性SA具有成熟SA的127aa最佳核心结构，SA与生物素结合半寿期≥12小时，高偶联效率,信号持久稳定。

9.SA的亲和兼容型含义是什么？

答：野生型SA与生物素结合后其解离常数为10-15，很难将SA与生物素分开。SA亲和兼容型是将SA分子进行结构修饰，使得含Strept-Tag的蛋白或者生物素化物质，在温和条件下从SA上洗脱下来，从而达到分离纯化的目的。

10.SA与Avidin的区别？

答：①链霉亲和素等电点（pI=6.0）比亲和素（pI=10.5）低，再加上不带任何糖基，链霉亲和素在应用中非特异性结合远比亲和素低；

②链霉亲和素更适合结合长臂生物素；

③链霉亲和素对热的耐受性比亲和素强；

④亲和素活性在13-15U，链霉亲和素活性在14-18U。

11.SA如何用作表面被料？

答：将SA包被于固相载体（聚苯乙烯等）表面，依靠蛋白质与固相载体表面的疏水作用通过物理吸附结合。

12.SA磁珠有何用途？

答：SA磁珠是将链霉亲和素偶联到磁性固相基质上，主要用于分离纯化带有Strept-Tag的蛋白或生物素化物质。较之SA层析介质，纯化操作更加的方便、快捷。

13.为什么有些SA-HRP产品信号不稳定？

答：①不同厂家标记的SA-HRP分子，一分子SA上标记的HRP数量不同

②HRP分子较大，可能会影响SA与生物素的结合

③不同厂家用于标记的HRP活性参差不齐

14.SA-荧光蛋白有何用途？

答：SA交联上荧光素（TSF系列）或者将SA与荧光蛋白融合表达（SA融合蛋白系列），在特定波长下，激发出不同颜色的荧光。利用SA与生物素或者生物素衍生物特异性结合的特性，可以用于生物素标记的抗原、抗体、核酸、蛋白或其它生物素标记分子的检测与定位，并且明显提高方法的灵敏度与特异性。如，流式细胞记数和检测、临床影像学成像等应用。

15.SA-荧光素酶有何用途？

答：SA-荧光素酶在加入底物（荧光素）时，会发出荧光。荧光素酶标体系发光是通过化学反应自发光，不需要外界光的激发，这样激发背景值就几乎没有，可得到比较好的信噪比。

在医学研究领域与基因工程中可作为重要工具,广泛用于ELISA(抗原、抗体)、Western Blot实验、病灶部位的定位与分析、单个细胞、转基因生物、动物和人体基因表达的实时、低光成像。

16.什么叫单体SA？

答：单体型链霉亲和素（mSA）是由野生四聚体链霉亲和素（Tetramer SA, tSA）分子改造而来。具有SA的127aa最佳核心肽段序列，每分子单体型SA（mSA）结合1个生物素分子，亲和力2.2 X 10-12/Mole。

17.单体SA与四聚体SA的区别？

答：四聚体SA是由4条相同的肽链组成，一分子链霉亲和素可以高度特异性地与四分子生物素结合。单体SA是由1条肽链组成，一分子链霉亲和素可以高度特异性地与一分子生物素结合。

18.单体SA有何特殊用途和利益？

答：单体SA较之天然的四聚体SA分子量更小，因此更容易透过细胞膜与靶位点结合，提高了检测的灵敏度。

19.什么是“链霉亲和素标签”（Strept-Tag）？

答：“链霉亲和素标签”（Strept-Tag）是一段由8个氨基酸(Trp-Ser-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys)构成的短序列，可以与SA的生物素结合位点，特异性的与SA结合。

20.Strept-Tag的优点和用途是什么？

答：将Strept-Tag与重组蛋白质融合后，可以采用SA层析介质（TSS系列、MSS系列）对重组蛋白进行检测或者分离纯化。Strept-Tag与SA的配合使用，大大提高了检测的灵敏度，蛋白的纯度。

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