实验常用试剂的配制方案
1M Tris-HCl |
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□组份浓度 1M Tris-HCl (pH7.4,7.6,8.0)
□配制量 1L
□配置方法
(1)称量121.1g Tris置于1L烧杯中。
(2)加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。
(3)按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
pH值 | 浓HCl |
7.4 | 约70mL |
7.6 | 约60mL |
8.0 | 约42mL |
(4)将溶解定容至1L。
(5)高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
1.5 M Tris-HCl |
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□组份浓度 1.5M Tris-HCl (pH8.8)
□配制量 1L
□配置方法
(1)称取181.7g Tris置于1L烧杯中。
(2)加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。
(3)用浓盐酸调pH值至8.8。
(4)将溶液定容至1L。
(5)高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
10×TE Buffer |
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□配制量 1L
□配置方法
(1)量取下列溶液,置于1L烧杯中。
1M Tris-HCl Buffer(pH7.4,7.6,8.0) 100mL
500 mM EDTA(pH8.0) 20mL
(2)向烧杯中加入约800mL的去离子水,均匀混合。
(3)将溶液定至1L后,高温高压灭菌。
(4)室温保存。
3M 醋酸钠 |
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□配制量 100mL
□配置方法
(1)称取40.8g NaOAc•3H2O置于100~200mL烧杯中,加入约40mL的去离子水搅拌溶解。
(2)加入冰乙酸调节pH值至5.2。
(3)加入去离子水将溶液定容至100mL。
(4)高温高压灭菌后,室温保存。
PBS Buffer |
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□配制量 1L
□配置方法
(1)称量下列试剂,置于1L烧杯中。
NaCl | 8g |
KCl |
0.2g
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Na2HPO4 |
1.42g
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KH2PO4 | 0.27g |
2)向烧杯中加入约800 mL的去离子水,充分搅拌溶解。
(
(3)滴加HCl将pH值调节至7.4,然后加入去离子水将溶液定容至1L。
(4)高温高压灭菌后,室温保存。
注意:上述PBS Buffer中无二价阳离子,如需要,可在配方中补充1mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。
10 M醋酸铵 |
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□组份浓度 10 M 醋酸铵
□配制量 100mL
□配置方法
(1)称量77.1g醋酸铵置于100~200 mL烧杯中,加入约30 mL的去离子水搅拌溶解。
(2)加去离子水将溶液定容至100mL。
(3)使用0.22μm滤膜过滤除菌。
(4)密封瓶口于室温保存。
注意:醋酸铵受热易分解,所以不能高温高压灭菌。
10%(W/V)SDS |
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□组份浓度 10%(W/V)SDS
□配制量 100mL
□配置方法
(1)称量10g高纯度的SDS置于100~200mL烧杯中,加入约80mL的去离子水,68℃加热溶解。
(2) 滴加数滴浓盐酸调节pH值至7.2。
(3)将溶液定容至100mL后,室温保存。
2N NaOH |
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□组份浓度 2N NaOH
□配制量 100mL
□配置方法
(1)量取80mL去离子水置于100~200mL塑料烧杯中(NaOH溶解过程中大量放热,有可能使玻璃烧杯炸裂)。
(2)称取8g NaOH小心地逐渐加入到烧杯中,边加边搅拌。
(3)待NaOH完全溶解后,用去离子水将溶液体积定容至100mL。
(4)将溶液转移至塑料容器中后,室温保存。
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