PuriMag G-Avidin蛋白磁珠是将来源于蛋清的Avidin蛋白与羧基聚苯乙烯颗粒的共价偶联制备的磁性颗粒。Avidin蛋白是鸡蛋清和鸟类组织中存在的蛋白质。Avidin蛋白是一种富含色氨酸的糖蛋白,对酸或蛋白水解酶的变性具有很强的抵抗力。得到的磁珠是在pH范围为2至11时稳定。它们可用于亲和层析纯化,测定开发和免疫沉淀。另外,通过将Biotin掺入一种扩增聚合物中,Avidin磁性颗粒特别适用于物理分离聚合酶链式反应中产生的两条DNA链。 PuriMag G-Avidin- Biotin生物分子复合物易于使用磁铁与未结合的生物素 - 生物分子分离,因此提供了一种快速,简洁的方法来标记具有磁性纳米颗粒的生物分子。
直径:200nm
在2-8℃(最多3个月)储存在缓冲液(25mM tris-HCl,0.15M NaCl,0.05%吐温20,0.09%NaN 3,pH 7.2)中。不要冻结试剂。
生物素化的分子可以用8M盐酸胍,pH 1.5或用SDS-PAGE样品缓冲液煮沸从PuriMag G-抗生物素蛋白中洗脱。这些苛刻的洗脱条件可能导致抗生物素蛋白亚基浸入样品中。另外,抗生物素蛋白可能因这些亚基的丧失而丧失相当大的结合能力。
•本说明书中包含的协议是本产品的应用示例。特定应用和系统需要优化。
•洗脱缓冲液:0.1M甘氨酸•HCl,pH 2.8
B.程序 注意:所需抗原的量和孵育时间取决于所用的抗体 - 抗原系统,并且必须针对每个特定系统进行优化。为了适当混合,确保总反应体积不能完全填充微量离心管。 1.将Avidin磁珠和试剂平衡至室温。 2.为了形成免疫复合物,将生物素化抗体加入样品或裂解液中,在室温下孵育至少30分钟或在4℃下孵育过夜。 3.轻轻旋转Avidin磁珠瓶,以获得均匀的悬浮液。将适量的珠浆移液到微量离心管中。磁性分离并丢弃上清液。 4.加入结合缓冲液洗涤Avidin磁珠两次,磁力分离2分钟。丢弃上清液。 5.将免疫复合物添加到珠子中并在室温或4℃下混合孵育1小时。 6.用结合缓冲液洗涤抗生物素蛋白结合的复合物并磁力分离2分钟。丢弃上清液。重复此洗涤程序至少四次。 7.样品可以在SDS-PAGE样品缓冲液中煮沸并电泳用于分析。或者,将洗脱缓冲液加入到珠子中以回收抗原。如果使用0.1M甘氨酸•HCl,pH 2.8,则通过加入适当的浓缩缓冲液如1M Tris,pH 7.5(100μL该缓冲液至1mL样品就足够)立即去除液体并立即调节回收级分的pH。