PuriMagTM DetergentOut磁珠(高蛋白和肽回收率)可去除蛋白质/肽浓度低(1~ 100μg/mL)样品中常用的离子、非离子和两性离子表面活性剂。洗涤剂和表面活性剂用于增溶、稳定和解聚蛋白质和蛋白质复合物,然而,去污剂会干扰下游分析,例如 ELISA、等电聚焦和质谱 (MS)。PuriMagTMDetergentOut磁珠在表面活性剂浓度(0.5-1)下去除效率为95%,能够回收和表征低丰度蛋白质。
产品信息
体积:5mL
浓度: 50% 浆液 (如,5mL 沉降磁珠等于 10mL 的50% 浆液)
保存溶液: 0.15M NaCl 和0.05% NaN3
注意事项
• 必须将样品直接添加到树脂中,以去除去污剂,并有效回收蛋白质/肽。
• 使用一份样品对一份沉降树脂(例如,50μL 样品对 50μL 沉降磁珠)去除 SDS、脱氧胆酸钠、Triton™ X-100、Triton X-114 和 NP-40。
• 使用一份样品对两份沉降树脂(例如,50μL 样品对 100μL 沉降树脂)去除 CHAPS、辛基葡糖苷和辛基硫代葡糖苷。
表1. 磁珠最大去除表活量对照表
表面活性剂
最大去除浓度 (%)
SDS
1
Sodium deoxycholate
Triton X-100
Triton X-114
0.5
NP 40
0.75
CHAPS*
Octyl glucoside*
Octyl thioglucoside*
*使用样本体积1-2倍的沉降磁珠
平衡液
使用AMBIC, PBS, MES, MOPS, Tris or carbonate-bicarbonate at pH 5 to 10. 不要使用含有机溶剂的缓冲液。
去除表面活性剂操作流程
1. 使用前,彻底混匀磁珠。
2. 将200μl磁珠(沉降体积100μl)置于1.5ml离心管中。
3. 将试管置于磁力架上,收集磁珠并丢弃上清液。
4. 使用平衡液(每次400μl)上下吹打洗涤磁珠1分钟,共洗涤三次,收集磁珠并丢弃上清液。
5. 将含表面活性剂的蛋白或多肽样品100加入μl磁珠中,常温孵育10分钟。
6. 磁分离,将上清转移到新的离心管,即为纯化后的蛋白或多肽。