1. 概述
PuriMag G-Biotin是生物素偶联的磁性纳米颗粒,用于磁性分离抗生物素蛋白、亲和素或链霉亲和素标记的组分。磁珠具有大的表面积和高捕获效率。
2. 存储缓冲液
Tris缓冲液,pH7.4,加入蛋白质和防腐剂。
3. 储存和稳定性
PuriMag G-Biotin磁珠应储存在4-8℃。使用前将试剂达到室温(20-25℃),有效期一年。不要冻结,干燥或离心珠子,因为它们可能聚集导致活性丧失。
4. 测试原理
生物素磁珠与链霉亲和素标记的溶液一起温育,然后用磁铁分离。从磁珠中洗去未结合物质后,使用洗脱缓冲液将结合的链霉亲和素从磁珠上洗脱下来。然后将磁珠从洗脱液中磁性分离,手动除去溶液。
5. 产品特点
磁珠平均直径:〜200 nm
珠子浓度:10毫克/毫升
结合能力:≥30μg链霉亲和素/ mg磁珠
A. 提供的材料
生物素磁珠,5毫克/毫升
B. 其他材料(未提供)
1) 结合/清洗缓冲液:TBS-0.05%吐温20
2) 洗脱缓冲液:8M盐酸胍,pH 1.5
C. 分离程序
1. 吸取50μL(0.5mg)磁珠,每管加入1mL结合缓冲液洗涤磁珠。
2. 磁力分离2分钟或至上清液澄清。
3. 吸弃上清液。加入1mL结合缓冲液再洗涤一次。
4. 重复步骤2.取出并丢弃上清液。
5. 加入450μL结合缓冲液重悬磁珠。
6. 将50μL血清或细胞培养上清液加入磁珠中。
注意:样本量可以根据用户偏好进行修改。如果样品上清液体积<500μL,用结合缓冲液稀释至终浓度为500μL。
7. 使用旋涡或旋转器轻轻混合30分钟。
8. 使用磁力分离器磁力分离2分钟或至上清液澄清。
9. 去除并丢弃上清液。
10. 加入500μL结合缓冲液洗涤磁珠,并除去未结合的蛋白。
11. 再次重复步骤8和9。除去上清液。
12. 将100μL洗脱缓冲液加入磁珠中并充分混合。
13. 在室温下孵育10分钟,偶尔温和搅拌或涡旋。
14. 将洗脱的样品脱盐或透析以转移到合适的缓冲液中。