一、概述
维生素是维持人体生命活动所必需的一类营养物质，大多数由食物供给，属于人体内的一类调节物质。维生素分为水溶维生素和脂溶维生素。脂溶性维生素是指不溶于水而溶于脂肪类有机溶剂的维生素，包括例如维生素A、维生素D、维生素E和维生素K，其中维生素D包括例如维生素D2和维生素D3。脂溶性维生素的作用多种多样，除了直接参与和影响特异性的代谢过程外，它们多半还与细胞内核受体结合，影响特定基因的表达。脂溶性维生素在人体生长、代谢、发育过程中发挥着重要的作用。
合理的维生素水平对维持人体健康十分重要，准确测定人体中脂溶性维生素的含量，可以指导人们科学合理的补充维生素，预防疾病，提高生活质量，同时对脂溶性维生素缺乏或过量的临床判断、 治疗管理和生理评估具有辅助诊断的意义。对于脂溶性维生素的测定是临床样品中的一项重要任务。
VD在肝脏可转化为25羟基维生素D(25OH-VD)，其浓度水平与体内的VD直接相关，因此体内25OH-VD2、25OH-VD3可作为检测VD水平的生物标志物。VK是激活凝血因子以及蛋白质C和S的必须辅助因子，目前已知主要有K1、K2、K3、K4几种形式，四烯甲萘醌VK2(MK4)既是VK2的家族成员，也是肝外组织中K1的代谢物。当这些脂溶性维生素缺乏或过量时均会对人体造成伤害。
目前，临床上在测定样品中的脂溶性维生素时，由于临床样品成分复杂，不能直接进行检测，需要首先进行前处理，使样品进行适当的分离和纯化后才有可能进入后面的分析程序。现有技术中采用的脂溶性维生素的前处理方法包括蛋白沉淀(PPT)、液液萃取法(LLE)、固相萃取法(SPE)等。然而，现有技术中的前处理方法存在着无法实现自动化和/或无法同时实现脂溶性维生素A、D、E、K的有效检测的缺点。
本试剂盒采用聚合物包覆的PuriMagTM HLB磁珠接触样品，可以实现对多种脂溶性维生素的检测，实现高的检测灵敏度，并可进一步实现包括维生素K在内的多种脂溶性维生素的同时检测。
二、样品前处理方法
（1）试剂配制
内标工作液配制表
化合物
储备液浓度（μg/mL）
移取体积（μL）
内标工作液（μg/mL）
维生素A ‑d5
100
200
2
25‑羟基维生素D2‑d6
10
50
0.05
25‑羟基维生素D3‑d6
0.2
维生素E‑d6
1000
300
30
维生素K1‑d7
1
0.02
80%甲醇
‑
9050
（2）样品处理流程
步骤1→磁珠的预处理：上下颠倒磁珠悬浮液，混合均匀后取 200 μL磁悬液（2mg）到1.5mL离心管中，加入200uL甲醇涡旋振荡30S分散磁珠，磁分离，去除甲醇。加入200 μL纯水，磁分离，去除水。
步骤2→样本的磁固相萃取：取400μL内标工作液和400μL样本加入上述含磁珠的1.5mL离心管中，涡旋振荡5min分散磁珠，磁吸60S，去除上清液。
步骤3→淋洗：加入400μL纯水，涡旋振荡60S分散磁珠，磁吸60S，去除上清液。 加入400μL的20%乙腈，涡旋振荡60S分散磁珠，磁吸60S，去除上清液。
步骤4→洗脱：加入100μL乙腈，涡旋振荡2min分散磁珠，磁吸60S，取上清液上机检测。
本产品仅供科研用途！
